CAPACIDAD IN VITRO DE LOS
METABOLITOS DE PSEUDOMONAS SPP.
PARA INHIBIR PATÓGENOS ASOCIADOS
AL CULTIVO DE NICOTIANA TABACUM L.
IN VITRO CAPACITY OF PSEUDOMONAS SPP.
METABOLITES TO INHIBIT PATHOGENS ASSOCIATED
WITH NICOTIANA TABACUM L. CULTIVATION
Johana Carolina Guanoquiza Calero
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador
Fernando Abasolo Pacheco
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador
Cristhian John Macías Holguín
Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador
pág. 450
DOI: https://doi.org/10.37811/cl_rcm.v9i6.20870
Capacidad In Vitro de los Metabolitos de Pseudomonas Spp. para Inhibir
Patógenos Asociados al Cultivo de Nicotiana Tabacum L.
RESUMEN
El presente estudio tuvo como objetivo evaluar in vitro el efecto antagonista de metabolitos secundarios
de cinco cepas de Pseudomonas spp. frente a los fitopatógenos Fusarium oxysporum y Enterobacter
hormaechei, ambos asociados a enfermedades en el cultivo de Nicotiana tabacum L. La actividad
antifúngica se determinó mediante ensayos de inhibición del crecimiento micelial en agar PDA,
mientras que la actividad antibacteriana se cuantificó mediante análisis de transmitancia en caldo
nutritivo a 650 nm. Los resultados revelaron diferencias significativas entre los tratamientos.
Pseudomonas putida BO 4-4 presentó la mayor inhibición de F. oxysporum, con un 77.04 %, seguida
de otras cepas del mismo género con valores superiores al 70 %. En cuanto a la inhibición bacteriana,
Pseudomonas protegens CHA0 redujo considerablemente el crecimiento de E. hormaechei, alcanzando
una transmitancia del 6.6 %, frente al control, que registró solo 1.6 %, lo cual evidencia un mayor
desarrollo del patógeno. Este estudio confirma el potencial de los metabolitos de Pseudomonas spp.
para inhibir el crecimiento de hongos y bacterias fitopatógenas bajo condiciones controladas, sugiriendo
su uso como herramienta biotecnológica en el diseño de estrategias de biocontrol aplicables en la
agricultura.
Palabras claves: bacterias antagonistas, biocontrol, fusarium oxysporum, enterobacter hormaechei
1 Autor principal
Correspondencia: carolina.guanoquiza2015@uteq.edu.ec
Johana Carolina Guanoquiza Calero1
carolina.guanoquiza2015@uteq.edu.ec
https://orcid.org/0009-0003-1072-0642
Universidad Técnica Estatal de Quevedo
Quevedo, Ecuador
Fernando Abasolo Pacheco
fabasolo@uteq.edu.ec
https://orcid.org/0000-0003-2268-7432
Universidad Técnica Estatal de Quevedo
Quevedo, Ecuador
Cristhian John Macías Holguín
cristhian.macias2016@uteq.edu.ec
https://orcid.org/0000-0003-2068-8503
Universidad Técnica Estatal de Quevedo
Quevedo, Ecuador
DOI: https://doi.org/10.37811/cl_rcm.v9i6.20870
Capacidad In Vitro de los Metabolitos de Pseudomonas Spp. para Inhibir
Patógenos Asociados al Cultivo de Nicotiana Tabacum L.
RESUMEN
El presente estudio tuvo como objetivo evaluar in vitro el efecto antagonista de metabolitos secundarios
de cinco cepas de Pseudomonas spp. frente a los fitopatógenos Fusarium oxysporum y Enterobacter
hormaechei, ambos asociados a enfermedades en el cultivo de Nicotiana tabacum L. La actividad
antifúngica se determinó mediante ensayos de inhibición del crecimiento micelial en agar PDA,
mientras que la actividad antibacteriana se cuantificó mediante análisis de transmitancia en caldo
nutritivo a 650 nm. Los resultados revelaron diferencias significativas entre los tratamientos.
Pseudomonas putida BO 4-4 presentó la mayor inhibición de F. oxysporum, con un 77.04 %, seguida
de otras cepas del mismo género con valores superiores al 70 %. En cuanto a la inhibición bacteriana,
Pseudomonas protegens CHA0 redujo considerablemente el crecimiento de E. hormaechei, alcanzando
una transmitancia del 6.6 %, frente al control, que registró solo 1.6 %, lo cual evidencia un mayor
desarrollo del patógeno. Este estudio confirma el potencial de los metabolitos de Pseudomonas spp.
para inhibir el crecimiento de hongos y bacterias fitopatógenas bajo condiciones controladas, sugiriendo
su uso como herramienta biotecnológica en el diseño de estrategias de biocontrol aplicables en la
agricultura.
Palabras claves: bacterias antagonistas, biocontrol, fusarium oxysporum, enterobacter hormaechei
1 Autor principal
Correspondencia: carolina.guanoquiza2015@uteq.edu.ec
Johana Carolina Guanoquiza Calero1
carolina.guanoquiza2015@uteq.edu.ec
https://orcid.org/0009-0003-1072-0642
Universidad Técnica Estatal de Quevedo
Quevedo, Ecuador
Fernando Abasolo Pacheco
fabasolo@uteq.edu.ec
https://orcid.org/0000-0003-2268-7432
Universidad Técnica Estatal de Quevedo
Quevedo, Ecuador
Cristhian John Macías Holguín
cristhian.macias2016@uteq.edu.ec
https://orcid.org/0000-0003-2068-8503
Universidad Técnica Estatal de Quevedo
Quevedo, Ecuador
pág. 451
In Vitro Capacity of Pseudomonas Spp. Metabolites to Inhibit Pathogens
Associated with Nicotiana Tabacum L. Cultivation
ABSTRACT
The present study aimed to evaluate in vitro the antagonistic effect of secondary metabolites from five
Pseudomonas spp. strains against the phytopathogens Fusarium oxysporum and Enterobacter
hormaechei, both associated with diseases affecting Nicotiana tabacum L. Antifungal activity was
determined through assays measuring mycelial growth inhibition on PDA agar, while antibacterial
activity was quantified using transmitance analysis in nutrient broth at 650 nm. The results revealed
significant differences among treatments. Pseudomonas putida BO 4-4 showed the highest inhibition
of F. oxysporum, with 77.04%, followed by other strains of the same genus with values above 70%.
Regarding bacterial inhibition, Pseudomonas protegens CHA0 significantly reduced the growth of E.
hormaechei, achieving a transmitance of 6.6%, compared to the control, which recorded only 1.6%,
indicating a greater development of the pathogen. This study confirms the potential of Pseudomonas
spp. metabolites to inhibit the growth of phytopathogenic fungi and bacteria under controlled
conditions, suggesting their use as a biotechnological tool in the design of biocontrol strategies
applicable in agriculture.
Keywords: antagonistic bacteria, biocontrol, fusarium oxysporum, enterobacter hormaechei
Artículo recibido 20 octubre 2025
Aceptado para publicación: 15 noviembre 2025
In Vitro Capacity of Pseudomonas Spp. Metabolites to Inhibit Pathogens
Associated with Nicotiana Tabacum L. Cultivation
ABSTRACT
The present study aimed to evaluate in vitro the antagonistic effect of secondary metabolites from five
Pseudomonas spp. strains against the phytopathogens Fusarium oxysporum and Enterobacter
hormaechei, both associated with diseases affecting Nicotiana tabacum L. Antifungal activity was
determined through assays measuring mycelial growth inhibition on PDA agar, while antibacterial
activity was quantified using transmitance analysis in nutrient broth at 650 nm. The results revealed
significant differences among treatments. Pseudomonas putida BO 4-4 showed the highest inhibition
of F. oxysporum, with 77.04%, followed by other strains of the same genus with values above 70%.
Regarding bacterial inhibition, Pseudomonas protegens CHA0 significantly reduced the growth of E.
hormaechei, achieving a transmitance of 6.6%, compared to the control, which recorded only 1.6%,
indicating a greater development of the pathogen. This study confirms the potential of Pseudomonas
spp. metabolites to inhibit the growth of phytopathogenic fungi and bacteria under controlled
conditions, suggesting their use as a biotechnological tool in the design of biocontrol strategies
applicable in agriculture.
Keywords: antagonistic bacteria, biocontrol, fusarium oxysporum, enterobacter hormaechei
Artículo recibido 20 octubre 2025
Aceptado para publicación: 15 noviembre 2025
pág. 452
INTRODUCCIÓN
Nicotiana tabacum L. se encuentra entre las especies de mayor importancia agrícola mundial,
caracterizado por adaptarse a una amplia variedad de suelos y condiciones climáticas, además de
constituir una fuente significativa de ingresos para productores debido a que es la principal materia
prima utilizada en la producción de cigarrillos (Jia et al., 2024; Tsaliki et al., 2023).
El cultivo se enfrenta a múltiples enfermedades las que afectan tanto el rendimiento como la calidad del
producto final, impulsando la dependencia de agroquímicos para su control que cada vez genera mayor
preocupación por su impacto ambiental y aparición de resistencias (Liu et al., 2021). Por lo tanto, el
empleo de microorganismos benéficos que promuevan el crecimiento vegetal y actúen como agentes
biocontroladores se plantea como una alternativa sostenible y eficaz.
Dentro de estos microorganismos, Pseudomonas spp. son bacterias rizosféricas reconocidas por su
capacidad de promover el crecimiento vegetal y actuar como agentes biocontroladores frente a
fitopatógenos actuando mediante la producción de antibióticos, sideróforos y enzimas que degradan la
pared celular, así como compitiendo por nutrientes esenciales y estimulando el crecimiento vegetal
(Abo-Elyousr et al., 2021; Alattas et al., 2024; Mahapatra et al., 2024).
En estudios in vitro, diversas cepas han demostrado ser eficaces en la inhibición de Fusarium
oxysporum, evidenciando su potencial como agentes de biocontrol (Akhtar et al., 2010; Liu et al., 2021).
En los últimos años, la presencia de bacterias fitopatógenas ha cobrado relevancia en cultivos de interés
agrícola, destacándose especies como Enterobacter hormaechei, responsable de pudriciones en tallos
de Hylocereus costaricensis en Costa Rica, cuya capacidad patogénica fue confirmada mediante análisis
moleculares y morfológicos (Retana-Sánchez et al., 2019). Aunque este tipo de bacterias no ha sido
ampliamente estudiado en Nicotiana tabacum L., su identificación reciente en este cultivo en Ecuador
(Guanoquiza Calero et al., 2025) subraya la importancia de explorar alternativas sostenibles para su
control. El objetivo de esta investigación fue evaluar la actividad biocontroladora in vitro de cepas de
Pseudomonas spp. frente a Fusarium oxysporum y Enterobacter hormaechei.
INTRODUCCIÓN
Nicotiana tabacum L. se encuentra entre las especies de mayor importancia agrícola mundial,
caracterizado por adaptarse a una amplia variedad de suelos y condiciones climáticas, además de
constituir una fuente significativa de ingresos para productores debido a que es la principal materia
prima utilizada en la producción de cigarrillos (Jia et al., 2024; Tsaliki et al., 2023).
El cultivo se enfrenta a múltiples enfermedades las que afectan tanto el rendimiento como la calidad del
producto final, impulsando la dependencia de agroquímicos para su control que cada vez genera mayor
preocupación por su impacto ambiental y aparición de resistencias (Liu et al., 2021). Por lo tanto, el
empleo de microorganismos benéficos que promuevan el crecimiento vegetal y actúen como agentes
biocontroladores se plantea como una alternativa sostenible y eficaz.
Dentro de estos microorganismos, Pseudomonas spp. son bacterias rizosféricas reconocidas por su
capacidad de promover el crecimiento vegetal y actuar como agentes biocontroladores frente a
fitopatógenos actuando mediante la producción de antibióticos, sideróforos y enzimas que degradan la
pared celular, así como compitiendo por nutrientes esenciales y estimulando el crecimiento vegetal
(Abo-Elyousr et al., 2021; Alattas et al., 2024; Mahapatra et al., 2024).
En estudios in vitro, diversas cepas han demostrado ser eficaces en la inhibición de Fusarium
oxysporum, evidenciando su potencial como agentes de biocontrol (Akhtar et al., 2010; Liu et al., 2021).
En los últimos años, la presencia de bacterias fitopatógenas ha cobrado relevancia en cultivos de interés
agrícola, destacándose especies como Enterobacter hormaechei, responsable de pudriciones en tallos
de Hylocereus costaricensis en Costa Rica, cuya capacidad patogénica fue confirmada mediante análisis
moleculares y morfológicos (Retana-Sánchez et al., 2019). Aunque este tipo de bacterias no ha sido
ampliamente estudiado en Nicotiana tabacum L., su identificación reciente en este cultivo en Ecuador
(Guanoquiza Calero et al., 2025) subraya la importancia de explorar alternativas sostenibles para su
control. El objetivo de esta investigación fue evaluar la actividad biocontroladora in vitro de cepas de
Pseudomonas spp. frente a Fusarium oxysporum y Enterobacter hormaechei.
pág. 453
METODOLOGÍA
Lugar y condiciones del cultivo
Los ensayos se realizaron en los laboratorios de Biotecnología y Microbiología de la Universidad
Técnica Estatal de Quevedo (UTEQ), en Quevedo, Ecuador. Todos los procedimientos fueron
ejecutados bajo condiciones de esterilidad utilizando una cabina de flujo laminar clase II y se
mantuvieron a una temperatura ambiente controlada de 26 ± 2 °C. Se empleó material de vidrio
previamente esterilizado y reactivos de grado analítico.
Material genético
Las cepas de Pseudomonas spp. utilizadas (P. putida BMR2-4, P. putida PB 3-6, P. putida BO 4-4; P.
protegens CHA0; y P. veronii R4) fueron proporcionadas por el Banco de Rizobacterias de la
Universidad Técnica Estatal de Quevedo (UTEQ). Estas cepas fueron seleccionadas por su potencial
como agentes biocontroladores, y la información sobre sus metabolitos antagonistas, sideróforos y ácido
indol-3-acético (AIA) se ha reportado previamente en estudios internos de la institución y en literatura
relacionada.
Por otro lado, los fitopatógenos empleados fueron aquellos previamente aislados y caracterizados en un
estudio anterior (Guanoquiza Calero et al., 2025), donde se identificó Fusarium oxysporum y
Enterobacter hormaechei mediante análisis morfológico y PCR.
Actividad antagónica in vitro frente a Fusarium Oxysporum
Para determinar la actividad antifúngica de los metabolitos secundarios producidos por Pseudomonas
spp., se realizó mediante la técnica de difusión en disco descrita por (Balouiri et al., 2016), con
modificaciones adaptadas. Las cepas bacterianas se cultivaron en medio líquido King B durante 48
horas a 27 ± 2 °C con agitación constante de 120 rpm. Posterior a ello, los cultivos se centrifugaron a
10 000 rpm durante 15 min y el sobrenadante obtenido se filtró a través de membranas de 0,22 μm para
eliminar las células viables, obteniendo de esta manera el extracto libre de células que contiene los
metabolitos bacterianos.
El efecto inhibitorio se determinó en placas con medio Papa Dextrosa Agar (PDA) inoculadas en el
centro con un disco de 5 mm de diámetro del micelio activo de Fusarium oxysporum.
METODOLOGÍA
Lugar y condiciones del cultivo
Los ensayos se realizaron en los laboratorios de Biotecnología y Microbiología de la Universidad
Técnica Estatal de Quevedo (UTEQ), en Quevedo, Ecuador. Todos los procedimientos fueron
ejecutados bajo condiciones de esterilidad utilizando una cabina de flujo laminar clase II y se
mantuvieron a una temperatura ambiente controlada de 26 ± 2 °C. Se empleó material de vidrio
previamente esterilizado y reactivos de grado analítico.
Material genético
Las cepas de Pseudomonas spp. utilizadas (P. putida BMR2-4, P. putida PB 3-6, P. putida BO 4-4; P.
protegens CHA0; y P. veronii R4) fueron proporcionadas por el Banco de Rizobacterias de la
Universidad Técnica Estatal de Quevedo (UTEQ). Estas cepas fueron seleccionadas por su potencial
como agentes biocontroladores, y la información sobre sus metabolitos antagonistas, sideróforos y ácido
indol-3-acético (AIA) se ha reportado previamente en estudios internos de la institución y en literatura
relacionada.
Por otro lado, los fitopatógenos empleados fueron aquellos previamente aislados y caracterizados en un
estudio anterior (Guanoquiza Calero et al., 2025), donde se identificó Fusarium oxysporum y
Enterobacter hormaechei mediante análisis morfológico y PCR.
Actividad antagónica in vitro frente a Fusarium Oxysporum
Para determinar la actividad antifúngica de los metabolitos secundarios producidos por Pseudomonas
spp., se realizó mediante la técnica de difusión en disco descrita por (Balouiri et al., 2016), con
modificaciones adaptadas. Las cepas bacterianas se cultivaron en medio líquido King B durante 48
horas a 27 ± 2 °C con agitación constante de 120 rpm. Posterior a ello, los cultivos se centrifugaron a
10 000 rpm durante 15 min y el sobrenadante obtenido se filtró a través de membranas de 0,22 μm para
eliminar las células viables, obteniendo de esta manera el extracto libre de células que contiene los
metabolitos bacterianos.
El efecto inhibitorio se determinó en placas con medio Papa Dextrosa Agar (PDA) inoculadas en el
centro con un disco de 5 mm de diámetro del micelio activo de Fusarium oxysporum.
pág. 454
Sobre la superficie del agar se colocaron discos estériles de papel filtro (5 mm de diámetro) impregnados
de metabolitos, dispuestos de manera de cruz del centro. Las placas de PDA inoculadas por Fusarium
oxysporum sin discos bacterianos se utilizaron como control.
La incubación se llevó a cabo a 27 °C ± 2 °C durante siete días, es decir, un período necesario para el
crecimiento completo de micelios en las placas de control (Sokołowski et al., 2024). A continuación, se
midieron los diámetros de las zonas de inhibición fúngica alrededor de los discos bacterianos. La
actividad antifúngica se calculó como el porcentaje de inhibición del crecimiento micelial (PICM)
utilizando la siguiente ecuación, donde:
R1: Diámetro de la colonia fúngica de control.
R2: Diámetro de la colonia fúngica de los tratamientos
𝐏𝐈𝐂𝐌 = 𝑅1 − 𝑅2
𝑅1 ∗ 100
Actividad antagónica in vitro frente a Enterobacter Hormaechei
La capacidad antibacteriana de los metabolitos de Pseudomonas spp. sobre Enterobacter hormaechei
se evaluó en cultivo líquido, empleando los metabolitos previamente obtenidos según lo descrito para
Fusarium oxysporum. En frascos Erlenmeyer se dispuso 10 mL de medio CPG, a los cuales se añadieron
1 000 μL del filtrado de metabolitos de cada cepa de Pseudomonas spp. y 200 μL del cultivo de E.
hormaechei.
Los frascos se incubaron a 26 °C en un agitador a 150 rpm durante 24 h. Tras la incubación, se registró
la transmitancia (%T) de cada muestra utilizando un espectrofotómetro a 650 nm, siguiendo
metodologías previamente descritas para Enterobacterales (Axelsson et al., 2024). El control incluyo
la bacteria sola. Cada tratamiento se realizó por triplicado y los resultados se expresaron como las
medias de las repeticiones.
Diseño experimental
Los ensayos de biocontrol se desarrollaron bajo un diseño completamente al azar, considerando tres
repeticiones por tratamiento (Tabla 1). Se establecieron experimentos independientes para evaluar la
acción de Pseudomonas spp., frente a Fusarium oxysporum y frente a enterobacterias.
Sobre la superficie del agar se colocaron discos estériles de papel filtro (5 mm de diámetro) impregnados
de metabolitos, dispuestos de manera de cruz del centro. Las placas de PDA inoculadas por Fusarium
oxysporum sin discos bacterianos se utilizaron como control.
La incubación se llevó a cabo a 27 °C ± 2 °C durante siete días, es decir, un período necesario para el
crecimiento completo de micelios en las placas de control (Sokołowski et al., 2024). A continuación, se
midieron los diámetros de las zonas de inhibición fúngica alrededor de los discos bacterianos. La
actividad antifúngica se calculó como el porcentaje de inhibición del crecimiento micelial (PICM)
utilizando la siguiente ecuación, donde:
R1: Diámetro de la colonia fúngica de control.
R2: Diámetro de la colonia fúngica de los tratamientos
𝐏𝐈𝐂𝐌 = 𝑅1 − 𝑅2
𝑅1 ∗ 100
Actividad antagónica in vitro frente a Enterobacter Hormaechei
La capacidad antibacteriana de los metabolitos de Pseudomonas spp. sobre Enterobacter hormaechei
se evaluó en cultivo líquido, empleando los metabolitos previamente obtenidos según lo descrito para
Fusarium oxysporum. En frascos Erlenmeyer se dispuso 10 mL de medio CPG, a los cuales se añadieron
1 000 μL del filtrado de metabolitos de cada cepa de Pseudomonas spp. y 200 μL del cultivo de E.
hormaechei.
Los frascos se incubaron a 26 °C en un agitador a 150 rpm durante 24 h. Tras la incubación, se registró
la transmitancia (%T) de cada muestra utilizando un espectrofotómetro a 650 nm, siguiendo
metodologías previamente descritas para Enterobacterales (Axelsson et al., 2024). El control incluyo
la bacteria sola. Cada tratamiento se realizó por triplicado y los resultados se expresaron como las
medias de las repeticiones.
Diseño experimental
Los ensayos de biocontrol se desarrollaron bajo un diseño completamente al azar, considerando tres
repeticiones por tratamiento (Tabla 1). Se establecieron experimentos independientes para evaluar la
acción de Pseudomonas spp., frente a Fusarium oxysporum y frente a enterobacterias.
pág. 455
Los datos experimentales se analizaron mediante análisis de varianza (ANOVA) y prueba de Tukey
(p<0.05) para determinar diferencias significativas entre tratamientos, utilizando el software estadístico
InfoStat.
Tabla 1. Tratamientos y repeticiones del ensayo in vitro
Tratamientos Descripción Repeticiones
T1 Pseudomona putida BMR 2-4 + Patógeno 3
T2 Pseudomona putida PB 3-6 + Patógeno 3
T3 Pseudomona putida BO 4-4 + Patógeno 3
T4 Pseudomona protegens CHAO + Patógeno 3
T5 Pseudomona veronii R4 + Patógeno 3
Control Control (Patógeno) 3
RESULTADOS
Antagonismo in vitro de los metabolitos de las Pseudomonas spp., frente a F. oxysporum
El análisis estadístico mostró diferencias significativas entre los tratamientos (F=3.6; p=0.045) lo que
indica que la actividad antifúngica de los metabolitos extracelulares de Pseudomonas spp. varió según
la cepa utilizada. En la Figura 1, el tratamiento T3, correspondiente a los metabolitos de Pseudomonas
putida BO 4-4, registró el mayor porcentaje de inhibición del crecimiento micelial del hongo, con un
valor de 77.04 %. Le siguieron los tratamientos T1 (P. putida BMR 2-4), T4 (P. protegens CHA0) y T2
(P. putida PB 3-6), con valores de inhibición de 71.02 %, 70.82 % y 70.22 %. Por su parte, el tratamiento
T5 (P. veronii R4)presentó la menor actividad antifúngica, con un porcentaje de inhibición del 67.85 %
Figura 1. Porcentaje de inhibición de las cepas de Pseudomonas spp., frente a F. oxysporum. Letras
iguales no difieren según la prueba de Tukey (p<0.05)
ab ab
a
ab b
40
45
50
55
60
65
70
75
80
T1 T2 T3 T4 T5
% de inhibición
Tratamientos
Los datos experimentales se analizaron mediante análisis de varianza (ANOVA) y prueba de Tukey
(p<0.05) para determinar diferencias significativas entre tratamientos, utilizando el software estadístico
InfoStat.
Tabla 1. Tratamientos y repeticiones del ensayo in vitro
Tratamientos Descripción Repeticiones
T1 Pseudomona putida BMR 2-4 + Patógeno 3
T2 Pseudomona putida PB 3-6 + Patógeno 3
T3 Pseudomona putida BO 4-4 + Patógeno 3
T4 Pseudomona protegens CHAO + Patógeno 3
T5 Pseudomona veronii R4 + Patógeno 3
Control Control (Patógeno) 3
RESULTADOS
Antagonismo in vitro de los metabolitos de las Pseudomonas spp., frente a F. oxysporum
El análisis estadístico mostró diferencias significativas entre los tratamientos (F=3.6; p=0.045) lo que
indica que la actividad antifúngica de los metabolitos extracelulares de Pseudomonas spp. varió según
la cepa utilizada. En la Figura 1, el tratamiento T3, correspondiente a los metabolitos de Pseudomonas
putida BO 4-4, registró el mayor porcentaje de inhibición del crecimiento micelial del hongo, con un
valor de 77.04 %. Le siguieron los tratamientos T1 (P. putida BMR 2-4), T4 (P. protegens CHA0) y T2
(P. putida PB 3-6), con valores de inhibición de 71.02 %, 70.82 % y 70.22 %. Por su parte, el tratamiento
T5 (P. veronii R4)presentó la menor actividad antifúngica, con un porcentaje de inhibición del 67.85 %
Figura 1. Porcentaje de inhibición de las cepas de Pseudomonas spp., frente a F. oxysporum. Letras
iguales no difieren según la prueba de Tukey (p<0.05)
ab ab
a
ab b
40
45
50
55
60
65
70
75
80
T1 T2 T3 T4 T5
% de inhibición
Tratamientos
pág. 456
Transmitancia de Enterobacter hormaechei en presencia de metabolitos de Pseudomonas spp.
Se observaron diferencias significativas entre los tratamientos evaluados (F = 715.79; p = 0.0001). El
tratamiento T4, correspondiente a Pseudomonas protegens CHA0, registró la mayor inhibición del
crecimiento de E. hormaechei, evidenciada por un valor de transmitancia de 6.6 %. Le siguió el
tratamiento T3, (Pseudomonas putida BO 4-4), con una transmitancia del 5.2 %. El control (sin
aplicación de metabolitos microbianos) presentó la menor transmitancia, con un 1.6 %, lo que refleja
un mayor crecimiento de E. hormaechei en ausencia de los metabolitos evaluados.
Figura 2. Transmitancia de E. hormaechei en presencia de metabolitos de Pseudomonas spp., a las 24
horas de experimentación a una longitud de onda de 650 nm. Letras iguales no difieren según la prueba
de Tukey (p<0.05)
DISCUSIÓN
La cepa P. putida BO 4-4 presentó el mayor efecto antagonista, lo que indica una mayor producción de
metabolitos secundarios con actividad antifúngica. Estos resultados concuerdan con lo reportado por
Weller (2007), quien destaca que diversas cepas de Pseudomonas son capaces de controlar hongos
fitopatógenos mediante la síntesis de compuestos antibióticos y sideróforos que limitan el acceso de
hierro al hongo, así como mediante enzimas que degradan la pared celular.
Estudios experimentales también respaldan esta capacidad. Islam et al. (2018) demostraron que aislados
rizosféricos de Pseudomonas inhibieron significativamente el crecimiento de F. oxysporum en ensayos
in vitro en plantas de pepino, lo que evidencia la eficacia de estas bacterias como agentes de biocontrol.
c
e
b
a
d
f
0,0
1,0
2,0
3,0
4,0
5,0
6,0
7,0
8,0
T1 T2 T3 T4 T5 Control
Tranmitancia a 650 nm
Tratamientos
Transmitancia de Enterobacter hormaechei en presencia de metabolitos de Pseudomonas spp.
Se observaron diferencias significativas entre los tratamientos evaluados (F = 715.79; p = 0.0001). El
tratamiento T4, correspondiente a Pseudomonas protegens CHA0, registró la mayor inhibición del
crecimiento de E. hormaechei, evidenciada por un valor de transmitancia de 6.6 %. Le siguió el
tratamiento T3, (Pseudomonas putida BO 4-4), con una transmitancia del 5.2 %. El control (sin
aplicación de metabolitos microbianos) presentó la menor transmitancia, con un 1.6 %, lo que refleja
un mayor crecimiento de E. hormaechei en ausencia de los metabolitos evaluados.
Figura 2. Transmitancia de E. hormaechei en presencia de metabolitos de Pseudomonas spp., a las 24
horas de experimentación a una longitud de onda de 650 nm. Letras iguales no difieren según la prueba
de Tukey (p<0.05)
DISCUSIÓN
La cepa P. putida BO 4-4 presentó el mayor efecto antagonista, lo que indica una mayor producción de
metabolitos secundarios con actividad antifúngica. Estos resultados concuerdan con lo reportado por
Weller (2007), quien destaca que diversas cepas de Pseudomonas son capaces de controlar hongos
fitopatógenos mediante la síntesis de compuestos antibióticos y sideróforos que limitan el acceso de
hierro al hongo, así como mediante enzimas que degradan la pared celular.
Estudios experimentales también respaldan esta capacidad. Islam et al. (2018) demostraron que aislados
rizosféricos de Pseudomonas inhibieron significativamente el crecimiento de F. oxysporum en ensayos
in vitro en plantas de pepino, lo que evidencia la eficacia de estas bacterias como agentes de biocontrol.
c
e
b
a
d
f
0,0
1,0
2,0
3,0
4,0
5,0
6,0
7,0
8,0
T1 T2 T3 T4 T5 Control
Tranmitancia a 650 nm
Tratamientos
pág. 457
Por otro lado, revisiones actuales (Alattas et al., 2024) destacan que la diversidad metabólica de
Pseudomonas spp. les permite actuar de manera efectiva frente a hongos patógenos, interfiriendo en
etapas del ciclo de vida, incluida la germinación de esporas, el crecimiento micelial y la formación de
estructuras reproductivas.
Por otro lado, la evaluación de la transmitancia de E. hormaechei en presencia de los metabolitos de
Pseudomonas spp. reveló un efecto inhibitorio, siendo la cepa Pseudomonas protegens CHA0 la más
eficaz. La reducción en transmitancia indica un menor crecimiento bacteriano, probablemente regulado
por metabolitos antagónicos como PR y PRN, capaces de interferir con la síntesis de proteínas
esenciales, afectar la integridad de la membrana celular o modular la regulación genética de la bacteria
(Canchignia Martínez et al., 2018).
Estos resultados son consistentes con estudios recientes sobre interacciones microbianas antagonistas,
que muestran que metabolitos de Pseudomonas spp. pueden limitar la proliferación de bacterias
fitopatógenas emergentes (Zhang et al., 2023). Así, los metabolitos de Pseudomonas spp. podrían
constituir una alternativa prometedora para controlar E. hormaechei en tabaco, aunque se recomienda
realizar estudios in vivo que confirmen la eficacia de estos agentes bajo condiciones de cultivo reales.
CONCLUSIONES
Las cepas de Pseudomonas spp. demostraron ser eficaces como agentes de biocontrol frente a
fitopatógenos de Nicotiana tabacum L., inhibiendo su crecimiento in vitro. Su uso podría reducir el
daño a las plantas, mejorar la rentabilidad del cultivo, proteger el medio ambiente y resguardar la salud
de los trabajadores. Se recomienda validar estos resultados mediante estudios in vivo para confirmar su
aplicabilidad práctica como estrategia sostenible de biocontrol.
AGRADECIMIENTOS
Agradecemos a la Universidad Técnica Estatal de Quevedo (UTEQ) por permitirnos llevar a cabo las
investigaciones en sus laboratorios de Biotecnología y Microbiología, así como por el apoyo logístico
brindado. También expresamos nuestro reconocimiento a los encargados de cada área, quienes
estuvieron siempre dispuestos a resolver nuestras dudas y facilitar el trabajo experimental. Finalmente,
extendemos nuestro agradecimiento a todas las personas que contribuyeron de manera directa o
indirecta al desarrollo de este estudio.
Por otro lado, revisiones actuales (Alattas et al., 2024) destacan que la diversidad metabólica de
Pseudomonas spp. les permite actuar de manera efectiva frente a hongos patógenos, interfiriendo en
etapas del ciclo de vida, incluida la germinación de esporas, el crecimiento micelial y la formación de
estructuras reproductivas.
Por otro lado, la evaluación de la transmitancia de E. hormaechei en presencia de los metabolitos de
Pseudomonas spp. reveló un efecto inhibitorio, siendo la cepa Pseudomonas protegens CHA0 la más
eficaz. La reducción en transmitancia indica un menor crecimiento bacteriano, probablemente regulado
por metabolitos antagónicos como PR y PRN, capaces de interferir con la síntesis de proteínas
esenciales, afectar la integridad de la membrana celular o modular la regulación genética de la bacteria
(Canchignia Martínez et al., 2018).
Estos resultados son consistentes con estudios recientes sobre interacciones microbianas antagonistas,
que muestran que metabolitos de Pseudomonas spp. pueden limitar la proliferación de bacterias
fitopatógenas emergentes (Zhang et al., 2023). Así, los metabolitos de Pseudomonas spp. podrían
constituir una alternativa prometedora para controlar E. hormaechei en tabaco, aunque se recomienda
realizar estudios in vivo que confirmen la eficacia de estos agentes bajo condiciones de cultivo reales.
CONCLUSIONES
Las cepas de Pseudomonas spp. demostraron ser eficaces como agentes de biocontrol frente a
fitopatógenos de Nicotiana tabacum L., inhibiendo su crecimiento in vitro. Su uso podría reducir el
daño a las plantas, mejorar la rentabilidad del cultivo, proteger el medio ambiente y resguardar la salud
de los trabajadores. Se recomienda validar estos resultados mediante estudios in vivo para confirmar su
aplicabilidad práctica como estrategia sostenible de biocontrol.
AGRADECIMIENTOS
Agradecemos a la Universidad Técnica Estatal de Quevedo (UTEQ) por permitirnos llevar a cabo las
investigaciones en sus laboratorios de Biotecnología y Microbiología, así como por el apoyo logístico
brindado. También expresamos nuestro reconocimiento a los encargados de cada área, quienes
estuvieron siempre dispuestos a resolver nuestras dudas y facilitar el trabajo experimental. Finalmente,
extendemos nuestro agradecimiento a todas las personas que contribuyeron de manera directa o
indirecta al desarrollo de este estudio.
pág. 458
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